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溶血性曼氏杆菌荧光定量PCR试剂盒探针法

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更新时间:2024-02-26

有效日期:还剩304

产品详情

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

产品名称

英文名称

规格

货号

溶血性曼氏杆菌荧光定量PCR试剂盒探针法

Mannheimia haemolytica

多种规格

BJ-P9767

2.jpg

特点:

1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。

2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。

3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。

4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。

5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。

6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

储存条件:-20℃以下,有效期12个月。

PCR检测试剂盒 (2).jpg



实验过程:

一、试剂准备

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步骤

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

三、注意事项

1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。

2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。

3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。

5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。

6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。

7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

操作流程

1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。

2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。

4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。

5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区,并单独存放。

6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。

7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。

8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。

9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。

PDI抑制剂(Ribostamycin sulfate)Ribostamycin sulfate1mL(10mM)|50mg

helicase-primase抑制剂(AmenamevirAmenamevir1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

HCV NS5A抑制剂(PibrentasvirPibrentasvir1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

锤头核酶抑制剂(Framycetin)Framycetin1mL(10mM)|5mg|10mg

碱性磷酸酶抑制剂(Tetramisole hydrochloride)Tetramisole hydrochloride1mL(10mM)|2g

HIV-1核苷酸逆转录酶抑制剂GS-7340 hemifumarate1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

HIV抑制剂(Pentosan PolysulfatePentosan Polysulfate100mg

DHFR抑制剂(Proguanil)Proguanil1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg

NF-κB抑制剂(Lipoic acid)Lipoic acid1mL(10mM)|500mg

S1P抑制剂(PF429242 dihydrochloridePF429242 dihydrochloride1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

溶血性曼氏杆菌荧光定量PCR试剂盒探针法 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)Insulin(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 BTLA 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)Insulin R-alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)FSH-beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)TSHbeta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-1 alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-1 beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 CLEC2D / OCIL 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 IL22BP / L22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-4(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-5(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

IL2RB / IL2 Receptor beta 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)IL-6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克




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