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酸性固绿染色液

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更新时间:2023-10-03

有效日期:还剩137

产品详情

培养操作步骤:

1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

中文名称:酸性固绿染色液

英文名称:

产品规格:2×50ml

货号:FS-X9937

产品介绍:

用途:

显示细胞中碱性蛋白,尤其是组蛋白

储存条件:室温,避光,12个月

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

阴沟肠杆菌脑蛋白44样蛋白抗体Human FYTTD1 小鼠3-硝基酪(3-NT)免疫试剂盒

泛枝芽孢杆菌嗜乳脂蛋白样9抗体Human FXYD7 小鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫试剂盒

野蘑菇BTB/POZ结构域蛋白7抗体Human FUT10 小鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒

多根硬皮马勃脑特异性血管生成抑制蛋白1抗体Human FYTTD1 小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒

相思根瘤菌Bcl2相关转录因子抗体Human FUT4 小鼠25羟基维生D3(25 HVD3)免疫试剂盒

乳杆菌属脑环核门控通道蛋白1抗体Human FUT7 小鼠25羟基胆固(25-OHC)免疫试剂盒

枯草芽胞杆菌癌易感基因复合蛋白4抗体Human FUT11 小鼠20S蛋白体(20SP)免疫试剂盒

猪轮状病纺锤体检查点蛋白抗体Human FUT8 小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)免疫试剂盒

谷棒杆菌有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体Human FUCA2 小鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)免疫试剂盒

酿酒酵母癌相关蛋白3抗体Human FUK 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)免疫试剂盒

伞枝犁头霉癌相关蛋白2抗体Human FUT9 小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫试剂盒

灰褐链霉菌癌抗雌激耐药蛋白1Human Fukutin 小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) 免疫试剂盒

枯草芽孢杆菌胞浆支链基转抗体Human FUSIP1 小鼠17-类固(17-KS)免疫试剂盒

线团拟诺卡氏菌磷化癌抗雌激耐药蛋白1抗体Human FUT10 小鼠17羟孕(17-OHP)免疫试剂盒

塔图姆氏菌属Tatumella│sp. 质量规格:>98%,BRα-辅肌动蛋白3试剂盒5-羟基-6,7-二氧基黄

假单胞菌Pseudomonas│sp. 质量规格:>98%,BRα-辅肌动蛋白1试剂盒5-羟基-7,8-二氧基黄

诺卡氏菌Nocardia│sp. 质量规格:>95%,BRα-防御4试剂盒去氢荷包牡丹碱
酸性固绿染色液球形芽孢杆 叶绿铜钠盐戊型肝炎病抗原

地中海拟无枝 沙美特罗类白抗原B27

热带假丝酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖补体因子P

出芽短梗霉 5-氨基异酞单甲酯丝肽抑制因子Kazal型4

空肠弯曲杆 苄基苯基碳酯色P4503A4

佛雷德里克斯堡假单胞 2-氨基-6-溴乙型脑炎病IgG抗体

Aurantimonas coralicida 2,6,7-三-3-三氟甲基喹喔啉维甲诱导基因1蛋白

疏水戈登氏 N-异基-4甲类固硫酯

荧光假单胞 9-双环[3.3.1]壬烷磺基转移

济州单胞 邻苄基苯3β羟基5类固脱氢

黑根霉 9-溴-1-壬烯胆固7α羟化

谷棒杆 2-溴-6-羟基吡啶类固17α单加氧

蜡状芽孢杆 4-(2,2,2-三氟乙氧基)类固异构

油菜核病 4-氨基-2--3-硝基吡啶皮质类固11β脱氢同工1

施氏假单胞 L-乳锂皮质类固11β脱氢同工2
操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)




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