产品详情
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:CDK抑制剂(LEE011 hydrochloride)
英文名称:LEE011 hydrochloride
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
货号:FS-X11088
产品介绍:
LEE011盐酸盐是CDK抑制剂,能靶向cyclin D1/CDK4和cyclin D3/CDK6,具有抗癌活性。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:1211443-80-9 别名:Ribociclib hydrochloride 分子量:471.0 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
尿皮质suUCN3抗体 Urocortin 3
上调基因4抗体(C端) URG4 (C terminal)
尿调节蛋白抗体 Uromucoid
泛su融合降解样蛋白1抗体 UFD1L
泛su特异性蛋白mei9X抗体 USP9X
去泛sumei抗体 USP
G蛋白偶联受体14抗体 GPR14
尿皮质su抗体 Urocortin
泛su羧基末端水解mei5互相作用蛋白1抗体 UCHL5IP
葡萄膜自身抗原Uaca抗体 UACA
FUT3抗体 FUT3/CD174
尿二磷suan葡萄糖醛suan转移mei2B4抗体 UGT2B4
CDK抑制剂(LEE011 hydrochloride)富士山红酵母 毛萼晶乙
ATCC 35659 Magnoloside A
链轮枝 Magnolianin
嗜麦芽糖寡养单胞 大果桉 L
许旺酵母 大果桉 K
耐盐深海球 大果桉 J
黑曲霉 垂石松 A
松口蘑 大果桉 I
胶纹灵芝 Longifloroside A
佛罗里达侧耳 柠檬
副鸡嗜血杆 Leuconolam
解淀粉芽孢杆 Labd-13-ene-8,15-diol
克鲁斯假丝酵母 南五味子
泡盛曲霉 2,2,4-基-1,3-戊二
贝伦格葡萄座腔 Itol A
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
风向检测仪 雷达雨量水位监测站 雷达水位雨量监测系统 野外在线雷达雨量水位监测站 自动雷达水位雨量监测系统 水情监测系统 水文监测仪器设备 雷达 水文监测站 水雨情监测系统 雷达水位监测报警系统 泥水位监测站 风力发电监测系统 风速监测仪 风速监测系统 干湿球温差 卧式恒温振荡器 Labchipgx全自动电泳仪 AKF系列智能卡尔费休水分测定仪 蒸汽喷射式制冷机 轴承感应加热器 直流高压电缆 圆盘流量计 水平螺翼式水表 无线多点气体监测系统 振动计 湿热盐雾箱 固体图像传感器 真空截止阀 催化反应釜 中性盐雾试验 智能安防监控 内置光纤型测温仪 电池测试等温量热仪 电能质量监测仪 压力表校验台 远红外加热器 菲格瑞思智能压力变送器 三足式自动刮刀卸料离心机 热电偶热电阻自动检定装置 河流湖泊水利在线监控系统 9060型喷砂设备 HHT-3型HART手操器 鞋底耐折测试 水泥电动抗折机 微机控制超低温全自动冲击试验机 FLUKE OPV-WGA/PRO网络综合协议分析仪 油漆搅拌机 荧光磁粉探伤机OMS-3000 电源插头 智能型液压阀基础科学问题研究