产品详情
中文名称:磷酸酶抑制剂(PP1活性抑制剂)(Salubrinal)
英文名称:Salubrinal
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
货号:FS-X10465
产品介绍:
英文名称:Salubrinal 产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg Salubrinal是一种磷酸酶(PP1)抑制剂,作用于真核生物翻译起始因子2亚基(eIF2α),抑制PP1活性,IC50?为1.7μM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:405060-95-9 纯度:99.58% 分子量:479.81 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
Hyphomonas adhaerensRAM-11抗体Anti-CYP1A2 Antibody(PB0574)整合α8(ITGα8)
草本枝孢霉抑癌基因Rbms3抗体Anti-CYP27A1 Antibody整合α7(ITGα7)
单增李斯特氏菌抵抗样分子α抗体Anti-CYP2A6 Antibody整合α6(ITGα6)
枯草芽孢杆菌质内的糖基化蛋白抗体Anti-CYP27A1 Antibody整合α5(ITGα5)
枯草芽胞杆菌性核糖体磷蛋白大亚基P0抗体Anti-CYP27B1 Antibody整合α4(ITGα4)
平菇RAN结合蛋白3抗体Anti-CYP2D6 Antibody整合α3(ITGα3)
扩展青霉环指蛋白35抗体Anti-CYP2C19 Antibody整合α2(ITGα2)
根瘤菌环指蛋白70抗体Anti-CYP2E1 Antibody整合α11(ITGα11)
淡紫拟青霉RH血型C糖蛋白抗体Anti-CYP2B6 Antibody整合α10(ITGα10)
黑曲霉磷化雷帕霉靶蛋白复合体2抗体Anti-CYP2E1 Antibody整合α1(ITGα1)
松口蘑环指蛋白138抗体Anti-CYP2E1 Antibody真核翻译延伸因子1γ(EEF1γ)
多根硬皮马勃(可)Nogo66受体相关蛋白3抗体Anti-CYP2E1 Antibody(PB0186)真核翻译起始因子6(EIF6)
成团肠杆菌(成团泛菌)Ras相关区域家族1A抗体Anti-CYP2S1 Antibody真核翻译起始因子4A2(EIF4A2)
拉考夫梅奇酵母Rh血型C抗原抗体Anti-CYP2U1 Antibody着丝粒蛋白I(CENPI)
短稳杆菌RAS家族关联结构域蛋白6抗体Anti-CYP3A4 Antibody(PB1111)着丝粒蛋白H(CENPH)
绿木霉Ras样蛋白A抗体Anti-CYP7A1 Antibody着丝粒蛋白F(CENPF)
谷棒杆菌Corynebacterium│glutamicum 质量规格:>98%,BR
ATCC51837=DSM7285=HAMBI2068=IFO(nowNBRC)15208=JCM10276=LMG17328=NCPPB2661资源名称: 玫瑰新鞘菌 质量规格:>98%,BR
蛹虫草Cordyceps│militaris (L.) Link 质量规格:0.97
磷酸酶抑制剂(PP1活性抑制剂)(Salubrinal)龟裂链霉龟裂亚种 4,7,13,16,21-五氧杂-1,10-二氮杂二环[8.8.5]廿三烷超敏胰岛
Lonsdalea quercina subsp. britannica 4-甲氧基-2-三氟瓜组蛋白H3
土生类诺卡氏 2--4-氟苯轻脂酞辅脱氢
鸭疫里氏杆 3-并噻吩-2-羧肿瘤坏死因子诱导蛋白6
黑曲霉 2--5-氟吡啶有机阳离子转运体
嗜果胶黄杆 3,5-二甲基异噁唑-4-甲酰钙网蛋白
简青霉 4-甲基-1,10-邻二氮杂菲脯
深海微杆 1,2,3,4,5-五苯基-1′-(二叔丁基膦)二茂铁基质金属蛋白7
苹果落叶交链孢霉 双[1,2-双(二苯基膦)乙烷]钯(0)胰岛样生长因子结合蛋白-1
出芽短梗霉 3-氟吡啶-2-甲14-3-3蛋白
Marinobacter 全氟三丁 (PFTBA)角蛋白
吕氏泰勒虫(崇信株) 5-溴吡啶-2-甲蛋白酪磷
黑曲霉 三铑二聚体色P450家族成员2C19
解淀粉芽孢杆 2-(三氟甲基)苯基肼盐盐有机阳离子转运体2
小马勃 3-(三氟甲基)苯肼盐盐转化蛋白RhoA-GTP