产品详情
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,价格实惠,多种规格供应,公司产品仅用于科研售后完善。
商品介绍:
英文名称 Anti-ADCY3
中文名称 腺苷酸环化酶3抗体
别 名 A cyclase III; AC3; adenylate cyclase 3; Adenylate cyclase type III; ADCY3_HUMAN; Adenylate cyclase type 3; ATP pyrophosphate-lyase 3; AC-III; Adenylate cyclase, olfactive type; AC3.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 免疫学 染色质和核信号 信号转导 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 126kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADCY3。
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
腺苷酸环化酶3抗体 | Anti-ADCY3 | 0.2ml/200μg | K210226 |
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
地衣芽孢杆菌Bacillus mycoides
大肠埃希菌Mycobacterium luteum
谷棒杆菌Bacillus subtilis subsp. subtilis
氏栖盐湖菌Achromobacter liquefaciens
少孢酵母Corynebacterium gultamicum
热带假丝酵母Pseudomonas chlororaphis
黑曲霉Mycobacterium sp.
黑曲霉Staphylococcus aureus
传染性牛鼻气管炎病Escherichia coli
锗栓孔菌Pseudomonas convexa
杂色曲霉Pseudomonas convexa
蜡状芽孢杆菌Pseudomonas aeruginosa
ATCC 9006Pseudomonas fluorescens
大肠埃希菌Pseudomonas fluorescens
稻生掷孢酵母Pseudomonas aeruginosa
橙灰紧旋链霉菌Pseudomonas geniculata
磷化p21激活激1抗体姬菇贝氏不动杆菌
磷化核糖体S6蛋白激抗体高大环柄菇生糖假葡糖杆菌
磷化p21激活激1/2/3抗体灰离褶伞人腺病毒
磷化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体裂盖马鞍菌产氮芽孢杆菌
腺苷酸环化酶3抗体透析袋通常为半透膜制成的袋状,以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换,透析的主要原理是:透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外,直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析。
本透析袋参数:扁平宽度为44mm,直径36mm,截留分子量14kDa。
储存条件:4℃,有效期2年。
注意事项
1)每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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