产品详情
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司专业供应的抗体,是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,价格实惠,多种规格供应,公司产品仅用于科研售后完善。
商品介绍:
英文名称 Anti-C19orf45
中文名称 19号染色体开放阅读框45抗体
别 名 chromosome 19 open reading frame 45; C19orf45; CS045_HUMAN; FLJ35784; FLJ56642; hypothetical protein LOC374877; Uncharacterized protein C19orf45.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 心血管 细胞生物 免疫学 糖尿病
蛋白分子量 predicted molecular weight: 57kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C19orf45
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
19号染色体开放阅读框45抗体 | Anti-C19orf45 | 0.2ml/200μg | K212137 |
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
β2微球蛋白(BMG/β2-MG)英文名称:BMG/β2-MG ELISA Kit白抗原B相关转录蛋白5抗体包装25mg
β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)英文名称:β2-GP1 IgA/G/M ELISA KitBTB/POZ结构域蛋白1(型肝炎病的NS5A反转录蛋白8)抗体包装500mg
α羟基丁脱氢(αHBDH)英文名称:αHBDH ELISA KitBCL7B蛋白抗体包装1g
α葡萄糖苷(α-glucosidase)英文名称:α-glucosidase ELISA Kit碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体包装250mg
α葡萄糖苷(a-Glu)英文名称:a-Glu ELISA KitB白血病/淋巴瘤蛋白7抗体包装5g
α-黑色细胞刺激(α-MSH)英文名称:α-MSH ELISA Kit先天性脂肪代谢障碍蛋白2抗体(常染色体显性遗传痉挛性截瘫17)包装1g
αS转移(α-GST)英文名称:α-GST ELISA KitB迁移基因1抗体包装5g
α干扰(IFN-α)英文名称:IFN-α ELISA Kit脊髓小脑共济失调蛋白BEAN1抗体包装1g
α干扰(IFNα)英文名称:IFNα ELISA KitB7H6蛋白抗体包装1g
α甘露糖苷(α Manase)英文名称:α Manase ELISA KitB特异性转录因子抗体包装5MG
α半乳糖基抗原(α-Gal)英文名称:α-Gal ELISA Kit桥连整合因子蛋白抗体包装1g
αN已酰基葡糖苷(αNAG)英文名称:αNAG ELISA KitBADH2抗体(稻)包装25g
αL岩藻糖苷(AFU)英文名称:AFU ELISA Kit丁酰酯单克抗体包装5g
αL艾杜糖苷(IDUA)英文名称:IDUA ELISA Kit磷化β 连环蛋白抗体包装1g
α2纤溶抑制物(α2-PI)英文名称:α2-PI ELISA Kitβ-乳球蛋白抗体包装25g
磷化内收蛋白a1抗体基质衍生因子2样蛋白1(SDF2L1)KY02111 promotes differentiation of hPSCs to cardiomyocytes by inhibiting Wnt si
19号染色体开放阅读框45抗体本试剂是直接从来源于人,动植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带,两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
注意事项:
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙烯管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品:调整样品体积到0.25ml,往组织或细胞中加入0.75ml 本试剂。待样品裂解后,加入并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml之前它不会抑制逆转录反应第yi链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀浆化后和加入之前,样品可以在–60~–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤4,RNA 漂洗)放置于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃下至少可保存一年。
7. 台式离心机大能达到2,600×g 的离心力的,如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
储存条件:4℃,有效期12个月。
本制品别名:人总RNA提取试剂|动物总RNA提取试剂|植物总RNA提取试剂|细菌总RNA提取试剂|酵母总RNA提取试剂
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