产品详情
参数规格:
产品名称:猪流行性腹泻病毒(PEDV)核酸定性检测试剂盒
产品规格:50T
产品货号:BJP64824
产品运输:低温运输
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物su等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物su酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
西洋参(标准品)英文名称: L-Methionine产品别名: 2-氨基噁唑-5-羧酸乙酯
菥蓂(标准品)英文名称: L-Methionine产品别名: 5-甲基-3-苯基异恶唑-4-羧酸
溪黄草(线纹香茶菜)(标准品)英文名称: L-Cystine产品别名: 3-甲基-1H-吡咯-4-甲
豨莶草(豨莶)(标准品)英文名称: L-Cystine hydrochloride产品别名: N,N-二甲基-1-十四烷基
洗碗叶(标准品)英文名称: L-Cysteine产品别名: 5-氨基异喹啉
细辛(北细辛)(标准品)英文名称: DL-Cysteine 产品别名: N,N-二甲基十二烷基
细辛脂素(标准品)英文名称: L-Histidine产品别名: 4-甲基哒
细叶远志皂苷(标准品)英文名称: L-Alanine产品别名: N N'-二乙基乙二
夏佛塔苷(标准品)英文名称: L-Tyrosine产品别名: 2-溴-3-氟苯
Fas活化激酶结构域蛋白2抗体 glycochenodeoxycholic acid (GCDCA) 质量规格:>97%
Fas活化激酶结构域蛋白1抗体 Sodium taurohyodeoxycholate hydrate 质量规格:≥98%,美国进口
F-box蛋白21抗体 Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts) 质量规格:>99%,USP
GATA结合蛋白1伴侣蛋白抗体 Valinomycin 质量规格:>95% (HPLC),进分
胎球蛋白B/Fetuin β抗体 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole 质量规格:>98%,*
叉头蛋白O1抗体 Sodium glycodeoxycholate 质量规格:>97%,进分,Sigma G9910
铁蛋白重链抗体 Sodium taurochenodeoxycholate 质量规格:≥97.0%,BR
类固受体复合物蛋白FKBP5抗体 glycodeoxycholicacid 质量规格:>97%,一水物
纤维性鞘结合蛋白1抗体 Tunicamycin 质量规格:>98%,进分
猪流行性腹泻病毒(PEDV)核酸定性检测试剂盒根瘤菌Anti-C9 Antibody仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
平凡假单胞菌Anti-CA1 Antibody拉丁属名: Pseudomonas trivialis
植物乳杆菌植物亚种Anti-C9orf72 Antibody拉丁属名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
小平菇(秀珍菇)Anti-CA1 Antibody仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
小单孢菌Anti-CA12 Antibody拉丁属名: Micromonospora sp.
椭园酿酒酵母Anti-CA2 Antibody用途: 啤酒酵母(英国啤酒厂)
热带假丝酵母Anti-CA4 Antibody拉丁属名: Candida tropicalis
鸭疫里氏杆菌Anti-CA3 Antibody(原货号PB1104)拉丁属名: anatipestifer
松针散斑壳Anti-CACNA1C Antibody(原货号PB0394)拉丁属名: Lophodermium pinastri
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。