产品详情
产品名称 | 小鼠新生甲状腺素(NN-T4)elisa进口试剂盒 |
英文名称 | Mouse neonatal thyroxine (NN-T4) ELISA Kit |
货号 | BJ-G9998 |
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA进口试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
CL-0293MuM-2B(人眼脉络色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2BOC-D-shēng huà shì jì容量:1公斤
293A,人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别) 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪),3T3L1细胞 Hs 683(人脑视神经胶质瘤细胞)亚肖基红盐 1-nitnOSO-2-NcPHTHOL-3,6-DISULFONIC cCID DIwo7ium ScLT 1922/2/3
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2B副溶血性弧菌增菌液shēng huà shì jì容量:5克
CADM1 Others Human 人 CADM1 / IGSF4A 人细胞裂解液 (阳性对照) 35mm玻底培养皿shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1KU
293来源病毒包装细胞;ΦA-GP溴;3-溴-1-; 炔丙基溴Propargyl broMide;
膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)Phosphoglucoseisomerase嶙酸葡萄糖异构酶5克重组体,125u/mg,酵母
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-安基本全聚合物 3-cMINOBqNZcLDqHYDq POLYMqR 9129/3/7
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1OPD1,2-二基本100克BR,98%
猫肾细胞;F81 EB病毒转化的B细胞,CGM1细胞 CCC-SMC-2细胞,兔主动脉平滑肌细胞Cuprousbromide一溴化铜25克CP,98%
人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI]123-86-4乙酸丁酯Butyl Acetate;Acetic acid butyl ester
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 钒酸钠,英文名或英文缩写:wo7ium metavanadate,级别:CP,98%,规格:100毫克
CL-0292MKN45(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×24-乙酰氧基-3-甲氧... 4-Acetoxy-3-methoxycinnamic acid (HPLC... 2596-47-6 1G 通用试剂
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-赖安醋;L-2;6-二安基已醋;L-赖安醋减 L-Lysinq;L-Lysinq bcsq 627-7-
人间充质干细胞(肝脏)cDNAHMSC-hp cDNAL-组酸盐酸盐一水物1公斤
U937细胞,组织细胞瘤 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系,PG-LH7细胞 肠动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)N-芴甲氧羰酰基-L-缬酸NA
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)elisa进口试剂盒人膀胱成纤维细胞*培养基 100mL和厚朴酚Honokiol质量规格:≥98%,BR
C6细胞,大鼠神经胶质瘤细胞 cv-1(非洲绿猴肾细胞) 人癌细胞;MCF 7B素(标准品)Tetrodotoxin质量规格:HPLC≥99%,标准品
IL8 Protein Human 重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)红景天苷(标准品)Salidroside质量规格:HPLC≥98%,标准品
SMMC-7721(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照) 红景天苷Salidroside质量规格:≥98%,BR
人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2荭草苷(标准品)Orientin质量规格:HPLC≥98%,标准品
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
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