犬肿瘤坏死因子β（TNFβ）ELISA Kit

犬肿瘤坏死因子β（TNFβ）ELISA Kit Canine Tumor necrosis factor β，TNFβ TNFα ELISA Kit

【实验用途】Tumor necrosis factor β，TNFβ，肿瘤坏死因子β。肿瘤坏死因子根据其产生来源和结构不同，可分为TNF-α和TNF-β两类。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α，把T淋巴细胞产生的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名为TNF-β。TNF-β是一种淋巴因子，抗原和丝裂原均可刺激T淋巴细胞分泌TNF-β。PMA刺激RPMI1788B淋巴母细胞可分泌高水平TNF-β。TNF-α与TNF-β的生物学作用极为相似，这可能与分子结构的相似性和受体的同一性有关。但在某些生物学作用方面也有不同之处。TNF-α和β发挥生物学效应的天然形式是同源的三聚体。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

​

公司提供ELISA Kit为我司主营产品之一，产品皆严格按照相关标准进行，并经过了严格地反复地检测，我们以严谨的态度保证产品的质量，从而保证您的实验顺利进行。产品名称供货周期短，供货及时，且我司还提供完整的售前和售后服务。

实验注意事项：
1、手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2、自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。 
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期：6个月。

实验前预备：
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线浓度)后，再准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入500μL的标准品稀释液，依次倍比稀释成 5,000pg/mL，2,500pg/mL，1,250pg/mL，625pg/mL，312pg/mL，156pg/mL，78pg/mL，标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B：Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如：10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2mL。

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

50次 糖蛋白蛋白纯化试剂盒  

50次 脂蛋白纯化试剂盒  

8次 细胞表面蛋白分离试剂盒 Bacterial Surface Protein Isolation Kit -20℃保存

10次 化蛋白富集试剂盒 Phosphate Protein Enrichment Kit -20℃保存

10次 ConA 糖蛋白分离试剂盒 Glycoprotein Isolation Kit （ConA） -20℃保存

10次 WGA 糖蛋白分离试剂盒 Glycoprotein Isolation Kit （WGA） -20℃保存

20次 包涵体微量纯化试剂盒 Inclusion Body Miniprep Kit 4℃保存（溶菌酶和核酸清除剂需要-20℃保存，包涵体溶解液室温保存）

5次 包涵体中量纯化试剂盒 Inclusion Body Midiprep Kit 常温保存（溶菌酶和核酸清除剂需要-20℃保存，包涵体溶解液室温保存）

2次 包涵体大量纯化试剂盒 Inclusion Body Maxiprep Kit 常温保存（溶菌酶需要-20℃保存）

100次 蛋白折叠试剂盒 Protein Folding Kit 4℃保存

100次 包涵体蛋白溶解及复性套装 Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack 常温保存

20次 一站式His标记蛋白质微量纯化套装(超声破碎细胞) One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介质请于20%乙醇中4℃保存，PMSF于-20℃保存，其余试剂4℃放置

20次 一站式His标记蛋白质微量纯化套装（酶溶破细胞） One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介质请于20%乙醇中4℃保存，PMSF于-20℃保存，其余试剂5℃放置

2mL 镍柱介质 Ni-Agarose Resin  4℃保存

犬肿瘤坏死因子β（TNFβ）ELISA Kit利莫那班羧酸 Rimonabant carboxylic acid 162758-35-2 质量规格：>98%

五肽胃泌素 Pentagastrin 5534-95-2 质量规格：>95%,BR

头孢哌酮钠(标准品) Cefoperazone sodium 62893-20-3 质量规格：效价测定

5-羟色胺酸（5-HTP） 5-Hydroxytryptophan 56-69-9 质量规格：>98%,混旋

Boc-D-酪氨酸 Boc-D-Tyr-OH 70642-86-3 质量规格：0.98

甲基橙(生物染色) Methyl orange 547-58-0 质量规格：BS

盐酸丙美卡因 Proparacaine HCl 1452000 质量规格：>98%,BR

L-异亮氨酸(标准品) L-Isoleucine 73-32-5 质量规格：HPLC≥98%，标准品

2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC)) 2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione 84405-44-7 质量规格：>97.0%(GC)

敌稗(分析标准品,98%) Propanil 709-98-8 质量规格：分析标准品,98%

灰黄霉素（标准品） Griseofulvin 126-07-8 质量规格：含量测定

葡聚糖D20/右旋糖苷 Dextran D20 9004-54-0 质量规格：MW:16000~24000

辣椒平 Capsazepine 138977-28-3 质量规格：>98%,美国进口