人脐静脉细胞融合细胞；EA.hy926操作步骤*

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细胞名称 人脐静脉细胞融合细胞；EA.hy926操作步骤
形态特性  内皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  在PEG胁迫下，将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合，构建了人脐静脉细胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培养基上生长并以八因子相关抗原筛选。 EA.hy926已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。 电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器，分化的内皮细胞特性如血管生成，体内平衡/血栓形成，血压及炎症反应。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463] 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
人脐静脉细胞融合细胞；EA.hy926操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
人脐静脉细胞融合细胞；EA.hy926操作步骤温馨提示:
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人细胞外基质磷试剂盒规格型号：96T/48T人细胞外基质磷试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人细胞外基质磷试剂盒、人细胞外基质磷elisa试剂盒保存条件：2-8℃保质期：6个月。
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BL21（DE3）plysS 菌种    12-42    1mL
50 次    血液 DNAout    
5mL    色素细胞生长因子 - 不含 TPA    
25mg    蛋白酶 K    
1mL    牛血清 γ 球蛋白标准品，2mg/mL    
β- 葡萄糖苷酶    9001-22-3    100UN
YPD 液体培养基    130895-100    100mL
5mg    衣    
100 次    胶回收及 PCR 片段纯化两用试剂盒    
10g    丽春红 S    
0.1mg    山羊抗兔 IgG，异硫氰酸荧光素标记    
#NAME?    830-81-9    5g
小鼠抗 MBP 标签单抗    130579-100    100μL
50 次    植物 RNAout    
25g    L- 胱氨酸    
5g    胆酸    
0.1 mL×10    XL10-Gold 感受态细胞    
葡聚糖凝胶 G-50 中颗粒    9048-71-9    25g
SDS-PAGE 预制胶    100915-12    12 块
人脐静脉细胞融合细胞；EA.hy926操作步骤50 次    柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒    
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