产品详情
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg图片客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg图片详细说明书:
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg图片实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg图片技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并zui大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
SHFS-00002866452规格: 48TLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受体*
SHFS-00002866453规格: 48THDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit 人高密度脂蛋白*
SHFS-00002866454规格: 48TAlpha-GST(Human Alpha-glutathione S-transferases) ELISA Kit 人α谷胱甘肽S转移酶*
SHFS-00002866455规格: 96TGSH-Px kit(human) 人谷胱甘肽过氧化物酶elisa试剂盒*
SHFS-00002866456规格: 48THcy(Human Homocysteic acid) ELISA Kit 人同型半胱氨酸*
SHFS-00002866457规格: 48TFFA(Human free fatty acids) ELISA Kit 人游离脂肪酸*
SHFS-00002866458规格: 48TON(Human osteonectin) ELISA Kit 人骨粘连蛋白*
SHFS-00002866459规格: 96TFA(Human Folic acid) ELISA Kit 人叶酸*SHFS-000587452超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit规格:96T/48T超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587453常染色体隐性遗传性耳聋59蛋白(DFNB59)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1 ELISA Kit规格:96T/48T常染色体隐性遗传性耳聋59蛋白(DFNB59)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1 ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587454肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2,AFP-L2 ELISA Kit规格:96T/48T肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2,AFP-L2 ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587455肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Mus musculus (Mouse)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit规格:96T/48T肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Mus musculus (Mouse)小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587456肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rattus norvegicus (Rat)小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit规格:96T/48T肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rattus norvegicus (Rat)小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit规格:96T/48T
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淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 ,英文名: Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit
淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒 ,英文名: Ly6a ELISA Kit
淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒 ,英文名: LFA-3/CD58 ELISA Kit
淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)ELISA试剂盒 ,英文名: LFA-2/CD2 ELISA Kit
淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒 ,英文名: LTB ELISA Kit
淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒 ,英文名: LTA ELISA Kit
亮脑啡肽(LEK)ELISA试剂盒 ,英文名: LEK ELISA Kit
亮氨酰-半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)ELISA试剂盒 ,英文名: LNPEP ELISA Kit
亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA试剂盒 ,英文名: LAP ELISA Kit
亮氨酸富含重复丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(LRRK2)ELISA试剂盒 ,英文名: LRRK2 ELISA Kit
亮氨酸氨基肽酶3(LAP3)ELISA试剂盒 ,英文名: LAP3 ELISA Kit
链激酶(SK)ELISA试剂盒 ,英文名: SK ELISA Kit
连蛋白(zonulin)ELISA试剂盒 ,英文名: zonulin ELISA Kit
粒细胞特异性抗核抗体(GS-ANA)ELISA试剂盒 ,英文名: GS-ANA ELISA Kit
粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒 ,英文名: GCP-2/CXCL6 ELISA Kit
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: GM-CSF Ab ELISA Kit
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 ,英文名: GM-CSF ELISA Kit
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒 ,英文名: G-CSF ELISA Kit
利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: Leishimaria Ab ELISA Kit
利钠肽(ANP)ELISA试剂盒 ,英文名: ANP ELISA Kit
利钾尿肽(KP)ELISA试剂盒 ,英文名: KP ELISA Kit
冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)ELISA试剂盒 ,英文名: CIRBP ELISA Kit
冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒 ,英文名: CG ELISA Kit
类粘蛋白2(ORM2)ELISA试剂盒 ,英文名: ORM2 ELISA Kit
类粘蛋白(ORM)ELISA试剂盒 ,英文名: ORM ELISA Kit
类似60S核糖体蛋白L21(LOC382344)ELISA试剂盒 ,英文名: LOC382344 ELISA Kit
类肌腱蛋白c(TNC)ELISA试剂盒 ,英文名: TNC ELISA Kit
类肌腱蛋白(TN)ELISA试剂盒 ,英文名: TN ELISA Kit
类固醇细胞抗体(SCA)ELISA试剂盒 ,英文名: SCA ELISA Kit
类风湿因子(RF)ELISA试剂盒 ,英文名: RF ELISA Kit
类白细胞抗原G(HLA-G)ELISA试剂盒 ,英文名: HLA-G ELISA Kit
类白细胞抗原E(HLA-E)ELISA试剂盒 ,英文名: HLA-E ELISA Kit
Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )5mg图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。