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Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片详细说明书:
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并zui大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
SHFS-00002866257规格: 48TTR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睾酮受体*
SHFS-00002866258规格: 48TM-AChR(Human muscarinic acetylcholine receptor) ELISA Kit 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体*
SHFS-00002866259规格: 48TGp49a(Human glycoprotein 49A) ELISA Kit 人糖蛋白49A*
SHFS-00002866260规格: 48TInhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B*
SHFS-00002866261规格: 48TOXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受体*
SHFS-00002866262规格: 96TGHRP-Ghrelin(Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 人生长激素释放肽ghrelin*
SHFS-00002866263规格: 48TCAM(Human calmodulin) ELISA Kit 人钙调素*
SHFS-00002866264规格: 48TTI(Human true insulin) ELISA Kit 人真胰岛素*SHFS-000587249单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Sus scrofa; Porcine (Pig)人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit规格:96T/48T单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Sus scrofa; Porcine (Pig)人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587250单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rhesus monkey (Simian)人组织因子(TF)ELISA试剂盒Human Tissue factor,IF ELISA Kit规格:96T/48T单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rhesus monkey (Simian)人组织因子(TF)ELISA试剂盒Human Tissue factor,IF ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587251单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Human tissue inhibitor of metal protease 1,TIMP-1 ELISA Kit规格:96T/48T单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Homo sapiens (Human)人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Human tissue inhibitor of metal protease 1,TIMP-1 ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587252单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Oryctolagus cuniculus (Rabbit)人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit规格:96T/48T单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Oryctolagus cuniculus (Rabbit)人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit规格:96T/48T
SHFS-000587253单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rattus norvegicus (Rat)人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit规格:96T/48T单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*Rattus norvegicus (Rat)人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit规格:96T/48T
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒 ,英文名: MSP ELISA Kit
酒石酸盐抵抗的酸性磷酸酶(TRAP)ELISA试剂盒 ,英文名: TRAP ELISA Kit
相关抗原7(SPAG7)ELISA试剂盒 ,英文名: SPAG7 ELISA Kit
精脒/精胺N(1)-乙酰转移酶样蛋白1(SATL1)ELISA试剂盒 ,英文名: SATL1 ELISA Kit
精胺合成酶(SRM)ELISA试剂盒 ,英文名: SRM ELISA Kit
精氨酰-tRNA合成酶(RARS)ELISA试剂盒 ,英文名: RARS ELISA Kit
精氨酸脱羧酶(ADC)ELISA试剂盒 ,英文名: ADC ELISA Kit
精氨酸酶2(ARG2)ELISA试剂盒 ,英文名: ARG2 ELISA Kit
精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒 ,英文名: Arg ELISA Kit
精氨酸加压素(AVP)ELISA试剂盒 ,英文名: AVP ELISA Kit
精氨酸(Arg)ELISA试剂盒 ,英文名: Arg ELISA Kit
晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒 ,英文名: Cryβ ELISA Kit
晶体蛋白α(Cryα)ELISA试剂盒 ,英文名: Cryα ELISA Kit
紧密连接蛋白1(ZO1)ELISA试剂盒 ,英文名: ZO1 ELISA Kit
金属肽酶含血小板反应蛋白1(ADAMTS1)ELISA试剂盒 ,英文名: ADAMTS1 ELISA Kit
金属硫蛋白2(MT-2)ELISA试剂盒 ,英文名: MT-2 ELISA Kit
金属硫蛋白2(MT2)ELISA试剂盒 ,英文名: MT2 ELISA Kit
金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 ,英文名: MT ELISA Kit
金葡菌肠毒素(SE)ELISA试剂盒 ,英文名: SE ELISA Kit
解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒 ,英文名: ADAM9 ELISA Kit
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。