产品详情
上海百蕊生物技术有限公司*经营ELISA试剂盒,细胞,生化试剂,胎牛血清,金标试剂盒,放免试剂盒,标准品,生物培养基,生物耗材等,如有需要请本公司销售人员。
用 途:
人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。本试剂盒于科研、而非用于临床诊断。
试验原理:
人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-2 和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:800pg/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
*标记的抗IL-2抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(60ml) | 1瓶(30ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可*保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
400 pg/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
200 pg/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100 pg/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50 pg/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25 pg/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0 pg/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(20×)的稀释:蒸馏水20倍稀释。
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育15分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案
| 标准品浓度(pg/ml) |
| ||||||||||
A | 800 | 800 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
B | 400 | 400 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
C | 200 | 200 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
D | 100 | 100 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
E | 50 | 50 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
F | 25 | 25 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
G | 0 | 0 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
H | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
结果分析
以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-2 标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-2 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
GS-E30648 | 大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 | Rat Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30649 | 大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 | Rat Interleukin 1α ,IL-1α ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30650 | 大鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 | Rat Interleukin 18,IL-18 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30651 | 大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 | Rat Interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30652 | 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒 | Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30653 | 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 | Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30654 | 大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 | Rat Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30655 | 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 | Rat intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30656 | 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 | Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30657 | 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒 | Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30658 | 大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒 | Rat Fractalkine/CX3CL1 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30659 | 大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 | Rat Fibronectin,FN ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30660 | 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 | Rat Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30661 | 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 | Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30662 | 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒 | Rat Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30663 | 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 | Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30664 | 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 | Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30665 | 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 | Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30666 | 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 | Rat Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30667 | 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 | Rat Activin A,ACV-A ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30668 | 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 | Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30669 | 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 | Rat Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30670 | 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒 | Rat macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30671 | 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒 | Rat macrophage inflammatory protein 1β,MIP-1β ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30672 | 裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒 | Nude mouse cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30673 | 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 | Nude mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30674 | 裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒 | Nude Mouse Clara cell protein,CC16 ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30675 | 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 | Nude Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30676 | 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒 | Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA K | 96T/48T |
GS-E30677 | 仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 | Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30678 | 仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒 | Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E30679 | 仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 | Hamster Cathepsin K,cath-K ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E40001 | 豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 | Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA试剂盒 | 96T/48T |
GS-E40002 | 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 | Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒 | 96T/48T |