产品详情
产品介绍:
Rhodamine 123 (罗丹明123, Rh 123)是一种常用的阳离子绿色荧光染料,可以透过细胞膜从而在活细胞线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位的荧光探针,并且对细胞没有任何毒性。 :62669-70-9 分子式:C21H17ClN2O3 分子量:380.82 纯度:≥98%(HPLC) 使用方法 1. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×104~5×105个/mL。 2. 孵育该载玻片,用 PBS或Hank’s 液洗涤细胞。 3. 用培养基稀释 Rh123母液以制备 1~20μM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。 4. 将 Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育 30 分钟至 1 小时。 5. 去除 Rh123 缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入 10%福尔马林缓冲液并孵育 15~20 分钟,接着用 PBS洗涤)。 6. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。 储存条件:-20℃避光,有效期一年 |
中文名称:罗丹明123
英文名称:Rhodamine 123
产品规格:5mg
货号:FS-X9644
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
蛋白激meiN1(PKN1)检测试剂盒 forProteinKinaseN1(PKN1)
接触蛋白3(CNTN3)检测试剂盒 forContactin3(CNTN3)
妊娠特异性β1-糖蛋白(PSG1)elisa检测试剂盒 英文名称:PSG1 ELISA Kit,PSG1,
桥粒芯糖蛋白3(DSG3)elisa检测试剂盒 英文名称:DSG3 ELISA Kit,DSG3,
趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)elisa检测试剂盒 英文名称:CCR2 ELISA Kit,CCR2,
前列腺蛋白类脂肪meiB(LIPB)elisa检测试剂盒 英文名称:LIPB ELISA Kit,LIPB,
破骨细胞刺激因子1(OSF)elisa检测试剂盒 英文名称:OSF ELISA Kit,OSF,
Ⅴ(F5)elisa检测试剂盒 英文名称:F5 ELISA Kit,F5,
内酰anmeiβ(LACTβ)elisa检测试剂盒 英文名称:LACTβ ELISA Kit,LACTβ,
钠/葡萄糖协同转运蛋白5(SGLT5)elisa检测试剂盒 英文名称:SGLT5 ELISA Kit,SGLT5,
糜蛋白mei原B2(CTRB2)elisa检测试剂盒 英文名称:CTRB2 ELISA Kit,CTRB2,
磷脂酰丝氨suan合mei2(PTDSS2)elisa检测试剂盒 英文名称:PTDSS2 ELISA Kit,PTDSS2,
磷suan甘油suan变位mei5(PGAM5)elisa检测试剂盒 英文名称:PGAM5 ELISA Kit,PGAM5,
外核suan焦磷suanmei/磷suan二酯mei6(ENPP6)elisa检测试剂盒 英文名称:ENPP6 ELISA Kit,ENPP6,
突触囊泡蛋白Ⅱ(SYT2)elisa检测试剂盒 英文名称:SYT2 ELISA Kit,SYT2,
脱氧核糖核suanmeiⅠ样2(DNASE1L2)elisa检测试剂盒 英文名称:DNASE1L2 ELISA Kit,DNASE1L2,
停靠蛋白2(DOK2)elisa检测试剂盒 英文名称:DOK2 ELISA Kit,DOK2,
罗丹明123相关物质A标准品 规格:15mg 英文名称:
钙三chun标准品 规格:10mg 英文名称:
骨化三chun溶液标准品 规格:5ml 英文名称:Calcitriol Solution
强力霉su相关杂质A标准品 规格:10mg 英文名称:
别嘌chun相关物质F标准品 规格:25mg 英文名称:
L-硒代蛋氨suan标准品 规格:100mg 英文名称:Selenomethionine
盐suan乙基去jia肾上腺su标准品 规格:200mg 英文名称:
盐suan普萘尔标准品 规格:200mg 英文名称:Propranolol Hydrochloride
盐suan美克嗪标准品 规格:500mg 英文名称:Meclizine Hydrochloride
曲mi帕明标准品 规格:25mg 英文名称: