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人IV型前胶原肽(PIVNP)ELISA Kit Human PIVNP ELISA Kit
【实验用途】IV型前胶原肽(PIVNP)。Ⅳ型胶原是肝基底膜的主要成分,它有两个末端,7s胶原组分为Ⅳ型胶原氨基末端的四聚体,NC1为Ⅳ型胶原羧基末端的二聚体,均参与寡聚体的形成,在肝脏受损后Ⅳ型胶原合成增多,慢性活动性肝炎多伴有进行性肝纤维化。肝细胞及间质细胞产生的Ⅲ型前胶原经肽酶切下两端的非螺旋球形伸展部即为前胶原肽而游离人血,测定血中Ⅲ型前胶原肽能反映肝细胞胶原合成量。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
公司提供ELISA Kit为我司主营产品之一,产品皆严格按照相关标准进行,并经过了严格地反复地检测,我们以严谨的态度保证产品的质量,从而保证您的实验顺利进行。产品名称供货周期短,供货及时,且我司还提供完整的售前和售后服务。
产品名称 | 人IV型前胶原肽(PIVNP)ELISA Kit |
英文名称 | Human PIVNP ELISA Kit |
货号 | SY-H9949 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
实验前预备:
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
1000U T7 RNA聚合酶 T7 RNA Polymerase -20℃保存
25000U T7 RNA聚合酶 T7 RNA Polymerase -20℃保存
1000U T3 RNA聚合酶 T3 RNA Polymerase -20℃保存
10000U T3 RNA聚合酶 T3 RNA Polymerase -20℃保存
1000U T4 核酸内切酶 V T4 Endonuclease V -20℃保存
500U 烷基腺嘌呤DNA糖基化酶 AAG(Alkyladenine DNA Glycosylase) -20℃保存
500U 甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶 FPG(Formamidopyrimidine DNA Glycosylase) -20℃保存
80U 8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶 OGG1(8-Oxoguanine DNA Glycosylase) -20℃保存
500U 尿嘧啶-DNA糖基化酶 Uracil DNA Glycosylase(UDG) -20℃保存
200U 尿嘧啶糖基化酶抑制剂 Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) -20℃保存
200U Afu 尿嘧啶 - DNA 糖基化酶 Afu Uracil-DNA Glycosylase -20℃保存
50U 尿嘧啶切刻酶 Uracile Nicking Enzyme -20℃保存
500U 人类单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶 hSMUG1 -20℃保存
500U Dam 甲基转移酶 Dam Methyltransferase -20℃保存
人IV型前胶原肽(PIVNP)ELISA Kit4'-己基苯乙酮(>96.0%(GC)) 4'-Hexylacetophenone 37592-72-6 质量规格:>96.0%(GC)
泽泻醇C-23-醋酸酯;泽泻醇C单乙酸酯 Alisol C monoacetate 26575-93-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
钼粉(>99%,BR) Molybdenium powder 7439-98-7 质量规格:>99%,BR
苯偶酰 (区域精制法精制,熔段数:22) Benzil Zone Refined (number of passes:22) 134-81-6 质量规格:
美雄诺龙(标准品) Mestanolone 521-11-9 质量规格:供HPLC法系统适用性试验用
盐酸诺拉曲噻 Nolatrexed dihydrochloride 152946-68-4 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
赤芝酸A Lucidenic acid A 95311-94-7 质量规格:HPLC≥97%
海沙瑞林 Hexareline 140703-51-1 质量规格:>98%
聚维酮 Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex 25655-41-8 质量规格:BR
亚甲基二水杨酸(异构体的混合物)(>90.0%(T)) Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers) 27496-82-8 质量规格:>90.0%(T)
甘氨酸苄酯盐酸盐 Glycine benzyl ester hydrochloride 2462-31-9 质量规格:0.98
1,2-二甲基-3-丙基化咪唑鎓(>98.0%(HPLC)(T)) 1,2-Dimethyl-3-propylimidazolium Iodide 218151-78-1 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
胰酶(1:250),胰酶粉 Pancreatin 8049-47-6 质量规格:酶活1:250,BR