产品详情
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Parelaphostrongylus teniusPCR |
编号 | FS-R1940 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
2′-脱氧尿苷-5′-单嶙酸二钠盐25克 HumanFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISA试剂盒人游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
123-33-1顺二酰3,6-Dixy7noxypyrid Humaniercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒规格:96T/48T
γ-L-谷酰-α-奈酰胺25克RT 鹅胆固醇(CH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
3--4-三 3-Chloro-4-fluorobenzotrifluoride,98% 78068-85-6 5G 通用试剂 人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)免疫试剂盒 Human fibrinopeptide A,FPA ELISA Kit
碱性品红/品红/盐基品红/碱性紫14/玫苯胺/深红色/红色苯胺染料/碱性新品红/玫瑰苯胺盐酸盐/(4-(4-基苯基)(4-亚基环己-2,5-二烯亚基)甲基)-2-胺盐酸盐/Fuchsin basic IND, 25、100、500克 国产/进口 人抗酸性磷酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP-5b ELISA Kit
NYSTATIN制霉菌素美国药典级米白色至淡黄色精细粉末FROZENsigma RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
L-乳酸钠 Sodium lactate,98% 867-56-1 5G 通用试剂 大鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RAES)ELISA试剂盒 ,英文名: RAES ELISA Kit
溴 Bromomethane,≥99.5% 74-83-9 100ML 通用试剂 Bovine neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 牛神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒
Lomefloxacinxy7nochloride盐酸扶罗沙星100毫克BR,50-70% Ratthyroxine,T4ELISAKit 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
7790-60-5钨酸钾potewwium tungstate CLIAKitforHO-1(Humanhemeoxygenase1)ELISAKit人血红素氧合酶1规格:48T/96T
2-amino-7-bromo-9,9-dimetxyl fluorene 28320-34-5 人绒毛膜促性腺激素(HCG)免疫试剂盒 Human Chorionic Gonadoophin,HCG ELISA Kit
1-己炔-3-醇 1-Hexyn-3-ol,97% 105-31-7 5ML 多肽试剂 Mouseisletcellaibody,ICAELISAKit小鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
X-GAL琼脂培养基1个RT IGF蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次
乙酸镉10克RT HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISA试剂盒人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
14807-96-6滑石粉Talc HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
脑膜蠕虫PCR检测试剂盒价格2-Bromo-6-fluoro-3-metxoxypxenylboronic acid 957062-89-4 石蜡切片组织PASE-5蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次
(2R)-(-)-缩水甘油... (2R)-()-Glycidyl tosylate,99% 113826-06-5 1G 通用试剂 Humanprostatespecificaigen,PSAELISA试剂盒人前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
十二烷基钠/月桂基钠/月桂醇钠/十二烷基氢钠/十二醇钠/发泡粉/SDS CP,86%,BR,99% 100\250\500克 国产/进口 Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BOC-Leu-Gly-ArgoPnaoHC1鲎试剂三肽100毫克BR,99% 大鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 ,英文名: C3a ELISA Kit
133627-17-5奈韦拉平相关物质ANevirapine Related CoMpound A;5,11-dixy7no-6H-11-etxyl-4-metxyl-dipyrido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-one Mouse Toll like receptor 9 (TLR-9/CD289) ELISA Kit 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒