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产品详情
产品介绍:
用途： 适用于多种细菌的鉴定 注意事项： 甲基红试剂有效成分为甲基红，由橘黄色变为红色则为阳性 储存条件：室温，避光，12个月 |
中文名称：甲基红试剂
英文名称：
产品规格：10ml|50ml
货号：FS-X10125
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
酿酒酵母烯酰水合1抗体Human SARDH(Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial) 犬间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒
大肠埃希菌烯酰水合含结构域蛋白2抗体Human HHAT (Protein-cysteine N-palmitoyltransferase HHAT) 犬维生K1(VK1)免疫试剂盒
德尔布有孢酵母肿瘤坏死因子受体超家族成员EDAR抗体Human GSKIP (GSK3-beta interaction protein) 犬维生E(VE)免疫试剂盒
乳杆菌属自身抗原EDC4抗体Human GAPVD1 (GTPase-activating protein and VPS9 domain-containing protein 1) 犬维生A(VA)免疫试剂盒
盘多毛孢菌E3泛蛋白连接EDD抗体Human GNMT(Glycine N-methyltransferase) 犬透明质4(HAase 4)免疫试剂盒
平滑假丝酵母胚胎外胚层发育蛋白EED抗体Human GVINP1 (Interferon-induced very large GTPase 1) 犬透明质3(HAase 3)免疫试剂盒
松木层孔菌转录接头蛋白EP300抗体Human GARNL3 (GTPase-activating Rap/Ran-GAP domain-like protein 3) 犬透明质2(HAase 2)免疫试剂盒
变化赖芽孢杆菌内皮脂肪抗体Human GDA (Guanine deaminase) 犬透明质1(HAase 1)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌MYC启动子结合蛋白1抗体Human GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) 犬透明质(HA)免疫试剂盒
硫磺绚孔菌内质网蛋白29抗体Human GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) 犬特殊基团成分(维生D结合蛋白)(GC)免疫试剂盒
酿酒酵母烯脂酰水解抗体Human GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) 犬髓过氧化物(MPO)免疫试剂盒
中国台湾几丁质单胞菌磷化4E结合蛋白1抗体Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 犬松弛肽/松弛(RLN)免疫试剂盒
贝莱斯芽胞杆菌三羟酰脱氢抗体Human GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 犬水通道蛋白5(AQP5)免疫试剂盒
*美味牛肝菌限制过度增殖相关蛋白EML4抗体Human GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 犬双氢睾(DHT)免疫试剂盒
发酵性酵母ETS1相关蛋白2抗体Human GMPR2 (GMP reductase 2) 犬视黄结合蛋白4(RBP-4)免疫试剂盒
亚美尼亚固氮菌EFHA1蛋白抗体Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 犬生长激(GH)免疫试剂盒
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：药根碱
嗜热地芽孢杆菌Geobacillus│thermoleovorans 质量规格：20-60 mesh香草
喜盐芽胞杆菌Halobacillus│sp. 质量规格：分析标准品,99%香叶木
甲基红试剂突孢毛壳 磷胍分支也交支链淀粉
产黄青霉 5-三氟甲基结合态淀粉合成
大肠埃希 DL-3-氨基丁淀粉分支
季也蒙假丝酵母 性大红GR可溶性淀粉合成
巴西果小克银汉霉 己戊酯腺二磷葡萄糖焦磷化
Pseudomonas tremae 4-甲基磺酰苯甲赖氨酰氧化
吉氏根瘤 N-(4-溴丁基)邻苯二甲酰亚赖氨酰氧化1
洋葱伯克霍尔德氏 2-甲氧基-1-萘赖氨酰氧化2
出芽短梗霉 正戊基苯赖氨酰氧化3
异常威克汉姆酵母 3-苯氧基-1,2-脱镁叶绿
大肠埃希氏 4-甲磺酰基溴苄磷甘油激
黑曲霉 (S)-3-羟基丁甲酯BCA蛋白
Cystofilobasidium 4-氨基苯甲酰肼壁性转化
黑曲霉 2-乙酯色P450羟化
球孢白僵 5-氨基-2-吡啶木质过氧化
