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屎肠球菌

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  • 上海上海市

更新时间:2023-08-01

有效日期:还剩103

产品详情

屎肠球菌低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
基本信息:
资源名称 屎肠球菌
种属:Enterococcus faecium  

安全等级 1

模式菌株 yes

应用领域 模式菌株

培养方法

培养基 MRS培养基:

酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸镁 0.2 g,乙酸钠 5.0 g,柠檬酸三铵 2.0 g,磷酸氢二钾 2.0 g,硫酸锰 0.05 g,吐温80 1.0 g,蒸馏水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。  

生长条件 37℃,微好氧
脱水存法:
屎肠球菌沙土保存法,能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20~-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达5~10年之久。
③ 石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
微生物菌种的培养:
屎肠球菌孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
注意事项:
1、屎肠球菌忌与杀菌的化学农药一并使用,使用过的杀菌剂或者喷雾器需要*清洗后才能使用。
2、包装开启后请一次性用完,未用完应密封,并放置于阴凉、干燥的环境里保存。
3、贮存方法:在密封、阴凉、干燥之处保存
二基钠MES Buffer,0.2M,pH6.5  1瓶

化钙,二水MES Buffer,0.5M,pH5.0 1瓶

钙离子载体MES Buffer,0.5M,pH5.5  1瓶

加拿大树胶MES Buffer,0.5M,pH6.0  1瓶

3-(环己)-1-磺酸MES Buffer,0.5M,pH6.5  1瓶

6- 羧基二酸荧光素MES Buffer,0.5M,pH7.4 1瓶

羧基纤维素钠盐MES Buffer,0.5M,pH8.0 1瓶

洋红MES Buffer,0.5M,pH8.5 1瓶

酸水解酪素MES Buffer,0.5M,pH9.0 1瓶

酶水解酪素MES Buffer,1.0M,pH5.0 1瓶

酪蛋白MES Buffer,1.0M,pH5.5 1瓶

过氧化酶 (牛肝)MES Buffer,1.0M,pH6.0  1瓶

噻孢霉素MES Buffer,1.0M,pH6.5  1瓶

纤维二糖MES Buffer,1.0M,pH7.0  1瓶
* Rappaport-Vassiliadis R10 Broth 

* Fluid Selenite - Cystine Medium 

* Bismuth Sulfite Agar 

* 亮绿琼脂 选择分离除伤寒沙门菌外的沙门氏菌,可与新生霉素添加剂合用500g

* Brilliant Green Agar 

* HE琼脂 从其它肠道革兰氏阴性菌中分离沙门氏菌和志贺氏菌500g
屎肠球菌胰蛋白大豆琼脂    用于无菌试验和多种菌的计数和分离培养500g

脑心浸液     500g

沙门氏菌显色培养基    用于鉴别包括伤寒杆菌在内的沙门氏菌1000ml   订购|咨询

巯基醋酸盐培养基(Brewer) (CM0023)    Oxoid 

Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培养基    Oxoid500G

卡里-布莱尔转运培养基 (CM0519)    Oxoid 

伊红美蓝琼脂(EMB)    250(g)




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