洋葱伯克霍尔德氏菌规格

洋葱伯克霍尔德氏菌规格注意事项：
1、忌与杀菌的化学农药一并使用，使用过的杀菌剂或者喷雾器需要*清洗后才能使用。
2、包装开启后请一次性用完，未用完应密封，并放置于阴凉、干燥的环境里保存。
3、贮存方法：在密封、阴凉、干燥之处保存
基本信息：
资源名称  洋葱伯克霍尔德氏菌规格
种属：Burkholderia cepacia  

安全等级 1

模式菌株 yes

应用领域 模式菌株，抗菌防腐剂的含量测定，培养基测试，产洋葱伯克菌素，质量控制菌株

培养方法

培养基 营养肉汁琼脂：

牛膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4?H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。  

生长条件 30℃，好氧
低温存法：
①洋葱伯克霍尔德氏菌规格简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。
脱水存法：
①洋葱伯克霍尔德氏菌规格沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。
③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。
二酸荧光素MuM-2B1台

D- 果糖 -6- 磷酸二钠N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine(TEMED) 1套

D- 果糖N,N’-Methylene Bisacrylamide（BIS）1套

酸性品红N/N1003A(RLE)1套

碱性品红NA Precipitation Solution1套

遗传霉素NAA (α-Naphthalene Acetic Acid)1套

葡萄糖 -6- 磷酸脱酶NAA (β-Naphthalene Acetic Acid)1套
*　Mannitol Salt Agar　

*　麦康凯肉汤　选择性培养基，用于水、食品中革兰氏阴性、乳糖发酵大肠杆菌群的检测500g

*　MacConkey Broth　

*　麦康凯琼脂　乳糖发酵基础上鉴别分离肠杆菌500g

*　MacConkey Agar　

*　紫红胆盐葡萄糖琼脂　鉴定和计数食品及乳制品中的胆盐耐受型革兰氏阴性菌500g
洋葱伯克霍尔德氏菌规格A-1 Broth A-1肉汤    1.00415.0500MERCK默克

CHAPMAN agar Staphylococcus selective agar 11 acc.to CHAPMAN    1.05469.0500MERCK默克

Hektoen enteric agar Hektoen 肠琼脂    1.11681.0500MERCK默克

MSRV selective supplement MSRV 选择添加剂    1.09874.0001MERCK默克  

胰蛋白大豆琼脂    用于无菌试验和多种菌的计数和分离培养500g
微生物菌种的培养：
⒈洋葱伯克霍尔德氏菌规格孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。