产品详情
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Norwalk Viruses G4(NV4)G4RTPCR |
编号 | FS-R1891 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
丫啶黄素shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100u Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
石油醚 100-140℃NA Humanfarnesyl-diphosphatefarnesylansferase1,FDFT1ELISA试剂盒人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N,N-二环己基碳酰亚,英文名或英文缩写:DCCI,级别:AR,99%,规格:1克 humanImmunoglobulinE,IgEELISAKit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
3--4-硝基 3-Fluoro-4-nitro,99% 446-34-4 1G 通用试剂 猴γ干扰素(IFN-γ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
精胺/O,O-二甲基硫代磷酰胺/精碱/精素/N,N′-双(3-基丙基)-1,4-丁/α,δ-双(γ-丙基)丁烷/1,12-二基-4,9-二氮十二烷/Spermine 生物技术级,97%, 1/5克 SigmaS3256 人氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)免疫试剂盒 Human Peroxiredoxin 4,PRDX4 ELISA Kit
Triwo7iumtrimetaphosphate嶙酸三间酯100克CP,98% 石蜡切片脂质过氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)荧光染色试剂盒10次
磺酸钠 2-Hydroxyethanesulfonic acid sodium sa... 1562-00-1 25G 通用试剂 ELISAKitBMP-4人骨成型蛋白4规格:48T/96T
乙基环 Ethylcyclohexane,≥99.0% 1678-91-7 100ML 通用试剂 大鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸缓冲液蛋白组学级透明无色液体COLDsigma 人微管相关蛋白tau(MAPT)抗体免疫试剂盒 Human microtubule-associated protein tau (MAPT) aibody ELISA kit
94-62-2胡椒碱;胡椒辣碱Piperine;(E,E)-1-Piperoylpipeni7ine;1-Piperoylpipeni7ine;Piperylpipeni7ine 血清游离胆固醇(FC)含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
1,2,3,4-Tetraxy7no-2-(iodometxyl)nepxtxelene 104325-74-8 大鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA试剂盒 ,英文名: MIP1α ELISA Kit
2-乙基噻吩 2-Ethylthiophene,≥97.0 % 872-55-9 25G 多肽试剂 Canine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 犬α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒
硅酸shēng huà shì jì容量:RT,避光25克 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
嘌呤shēng huà shì jì容量:25克 CLIAKitforFPA(HumanfibrinopeptideA)ELISAKit人血纤肽/纤维蛋白肽A规格:48T/96T
100929-90-6甘酸-脯酰-4-甲氧基-beta-胺盐酸盐(-20°C)GLY-PRO 4-metxOXY-BETA-NAPHTHYLAMIDE xy7noCHLORIDE 细胞肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
44诺如病毒4型PCR检测试剂盒价格5-pxenylthiopxene-2,5-disulfonyl chloride 166964-37-0 Rat6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
二化磷酸苯酯 1,6-Hexanediol dimethacrylate 6606-59-3 25ML 通用试剂 CLIAKitforCPSA(Humancomplexedprostatespecificaigen)ELISAKit人复合前列腺特异性抗原规格:48T/96T
曙红Y(水溶)/伊红Y(水溶) /水溶伊/四溴荧光素二钠/曙红钠盐/四溴荧光黄/曙红变性次甲蓝/黄光曙红/曙红微黄/酸性红87/2,4,5,7-四溴-3,6-二羟基螺异苯丙呋-1(3H),9(9H)-占吨-3-酮二钠盐/Eosin Y sodium salt water soluble BS,85% 25克, 100ml 国产/进口 细胞氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒(羟自由基)20次
IEFANODEBUFFER,20XIEF阳极缓冲液,20X蛋白组学级透明无色溶液RTsigma Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
119478-56-7美罗培南MeropeneM 大鼠巢蛋白(NID)ELISA试剂盒 ,英文名: NID ELISA Kit