产品详情
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Ostertagia orloffiPCR |
编号 | FS-R1911 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
几丁质酶500毫克保存:-20℃,避光 人抗苗勒管激素(AMH)ELISA试剂盒 ,英文名: AMH ELISA Kit
双(4-硝基本基)磷酸水合物(+4℃)NA RatHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA试剂盒大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非动物源100 gm60-18-4RT Humanfibromodulin,FMODELISA试剂盒人纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2-溴-5- 2-Bromo-5-fluoro,98% 452-63-1 5G 通用试剂 humaninhibinbeta-B,InhbbELISAKit人抑制素β-B(Inhbb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
焦性没食子酸/焦酚/连苯三酚/邻苯三酚/1,2,3-苯三酚/1,2,3-三/没食子酚/焦酸/焦棓酚/焦棓酸/焦倍酚/Pyrogallic acid AR,99%, 100克 国产/进口 鹅心肌转录因子GATA6 ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
A-KETOGLUTARICACID,FREEACIDα-酮戊二酸高级白色至微黄色结晶或结晶粉末COLDsigma CLIAKitforHp-IgGELISAKit大鼠幽门螺旋菌IgG规格:48T/96T
2,4-二苯氧乙酸钠 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,,≥98.0% 2702-72-9 1G 通用试剂 细胞PHKG2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
二甲氧基 Dimethoxy methane,99% 109-87-5 100ML 通用试剂 ELISAKitTLR-9/CD289大鼠Toll样受体9规格:48T/96T
Nervonicacid神经酸100克CP,98% 大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒 ,英文名: HABP ELISA Kit
590-29-4钾;蚁钾potewwium forMate 人组织多肽抗原(TPA)ELISA检测试剂盒HumaissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T
4-(N-(3-Chloropxenyl)sulfamoyl)pxenylboronic Acid 957062-69-0 ELISAKitS-100人S100蛋白规格:48T/96T
2-甲基噻吩 2-Methylthiophene ,≥98% 554-14-3 25G 多肽试剂 大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)ELISA试剂盒 ,英文名: AGMAT ELISA Kit
Elek氏培养基25毫升2~8℃ 人纤连蛋白(FN)ELISA检测试剂盒HumanFibronectin,FNELISAKit 96T/48T
1,10-啰啉盐酸盐25克RT 伪狂犬病毒(PRV)核酸检测试剂盒 48T
10101-50-5高锰酸钠40%水溶液wo7ium PERMANGANATE CLIAKitforNGF-Beta(HumanNervegrowthfactor-Beta)ELISAkit人的神经生长因子-β规格:48T/96T
阿洛夫奥斯特线虫PCR检测试剂盒图片2,2'-Bithiopxene-5-carboxylic acid 2060-55-1 Mouse N terminal brain naiuretic peptide (-proBNP) ELISA Kit 小鼠N端前脑素(-proBNP)ELISA试剂盒
N-苄基甘酸乙酯 N-Benzylglycine ethyl ester,97% 6436-90-4 25G 通用试剂 ELISA 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouse M-CSF) 48T/96T 进口分装
十烷基基溴化铵/(1-癸基)基溴化铵/癸基基溴化铵/Decyltrimethylammonium bromide 超,99% 25克 国产/进口 CLIAKitforLCN2(Humanlipocalin2)ELISAKit人脂质运载蛋白2规格:48T/96T
Copper8-inoneolinonate8-羟基铜1克CP,98.5% 通用型RFLP基因分析试剂盒20次
443-48-1甲硝唑;;;甲硝哒唑;灭滴灵Metronidazole ELISAKitIFN-α猴α干扰素规格:48T/96T