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人半*蛋白酶-3(caspase-3)ELISA试剂盒作用

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更新时间:2019-07-20

有效日期:已过期

产品详情

上海琛艺实业有限公司涉足新的生物领域ELISA试剂盒,ELISA试剂盒研发的种属涵盖:人,大鼠,小鼠,猪,牛,羊,兔,植物,农残类,鱼类等。公司常备现货gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的细胞带STR鉴定,具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有竞争力的价格。公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。

 

【产品名称】:人半*蛋白酶-3(caspase-3)ELISA试剂盒作用

【供货期】: (现货供应)

【产品用途】:被测样品定性定量分析

【产品规格】:96T/48T(两种规格)

【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】:2-8℃

【产品性状】:液体盒装

【产品价格】:我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测

【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。

例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

 

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠白介素1α(IL-1α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白介素1α(IL-1α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

人半*蛋白酶-3(caspase-3)ELISA试剂盒作用理及要求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。*在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6

0.3mL*6

*

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、30、60、120、240、480 U/ml

结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

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试剂盒性能

1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.  灵敏度:低检测浓度小于1.0ng/ml

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6个月

7. elisa试剂盒实验方法类型和操作步骤?
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。(一)双抗体夹心法、(二)一步法、(三)间接法测抗体、(四)竞争法。
elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,10×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能
不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在
37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

问题

可能原因

解决方案

标准曲线差

吸取及洗涤不充分

充分的吸取及洗涤

移液不精确

检查和校正移液器

精密度低

洗涤不充分

按说明书要求充分洗涤和浸泡

混匀不充分和吸取试剂不足

充分混匀和吸取试剂

重复利用吸头、容器和覆膜

使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜

加样不精确

检查和校正移液器

O.D值低

每孔加的试剂量不精确

校正移液器,精确加入试剂

温育时间不正确

保证充足的温育时间

温育温度不正确

试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度

酶标记物或底物失效

通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查

没有加入终止液

按照说明书实验操作步骤加入终止液

超出读数时间读数

在说明书*的读数时间内读数

样本值

不正确的样本储存方式

正确储存样本,使用新鲜样本进行实验

不正确的样本收集和处理方法

采取正确的样本收集和处理方法

待测物质在样本中含量低

使用新鲜样本,重复实验

上海琛艺实业有限公司提供人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒,且能提供免费的代测服务。。。


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商家概况

主营产品:
ELISA试剂盒、细胞、胎牛血清
公司性质:
生产厂家

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