恙虫病东方体PCR检测试剂盒说明书

组成及试剂配制:
1、恙虫病东方体PCR检测试剂盒说明书酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

Grb2 ELISA Kit磷酸化转录因子E2F-1抗体生长因子受体结合蛋白2(Grb2)ELISA试剂盒
Grb10 ELISA KitEFHC1蛋白抗体生长因子受体结合蛋白10(Grb10)ELISA试剂盒
SSTR5 ELISA KitEFHC2蛋白抗体生长抑素受体5(SSTR5)ELISA试剂盒
SSTR4 ELISA KitEFHD1蛋白抗体生长抑素受体4(SSTR4)ELISA试剂盒
SSTR3 ELISA Kit突触结合蛋白2抗体生长抑素受体3(SSTR3)ELISA试剂盒
SSTR2 ELISA Kit核苷酸焦磷酸酶2抗体生长抑素受体2(SSTR2)ELISA试剂盒
SSTR1 ELISA Kit长链烯脂酰辅酶A水化酶抗体生长抑素受体1(SSTR1)ELISA试剂盒
SST ELISA Kit神经元，肌肉特异性烯醇化酶抗体生长抑素(SST)ELISA试剂盒
GAS6 ELISA Kit内皮分化型G蛋白偶联受体3抗体生长停滞特异性蛋白6(GAS6)ELISA试剂盒
GADD45α ELISA Kit发育相关蛋白ERCC6L抗体生长停滞DNA损伤可诱导蛋白α(GADD45α)ELISA试剂盒

100769-200401 50mg 喷昔洛韦 含量测定

100770-200401 100mg 阿那曲唑 含量测定

100771-201001 30mg 贝那普利拉 供HPLC法系统适用性用

100772-200401 20mg 齐多夫定杂质A 检查用

100773-200401 20mg 齐多夫定杂质B 检查用

100774-200401 10mg 盐酸氟西汀杂质C 检查用

100775-200401 100mg 拉莫三嗪 UV法含量测定

100776-200501 100mg 阿立哌唑 UV法含量测定

GDF3 ELISA Kit磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体生长分化因子3(GDF3)ELISA试剂盒
GDF11 ELISA KitEpsin2B蛋白抗体生长分化因子11(GDF11)ELISA试剂盒
GDF1 ELISA Kit表皮生长因子抗体生长分化因子1(GDF1)ELISA试剂盒
BTD ELISA Kit表皮生长因子样蛋白8抗体生物素酰胺酶(BTD)ELISA试剂盒
SEMG2 ELISA KitE3泛素连接酶抗体生精蛋白Ⅱ(SEMG2)ELISA试剂盒
SEMG1 ELISA Kit小鼠抗表皮生长因子抗体生精蛋白Ⅰ(SEMG1)ELISA试剂盒
MYF6 ELISA Kit抗表皮生长因子抗体生肌因子6(MYF6)ELISA试剂盒
MYF5 ELISA Kit内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗体生肌因子5(MYF5)ELISA试剂盒

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。